液體培養(yǎng)基的常見問題
液體培養(yǎng)基是最為常見的培養(yǎng)基類型,它具有可進(jìn)行通氣培養(yǎng)或振蕩培養(yǎng)的優(yōu)勢(shì),因?yàn)樗牧鲃?dòng)性便于精確控制培養(yǎng)基的溶液溫度、營(yíng)養(yǎng)濃度和氣體含量等;它對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)時(shí)的附著能力要求小,細(xì)胞可快速擴(kuò)增;當(dāng)需要大量細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)也更經(jīng)濟(jì)高效。那么你知道液體培養(yǎng)基的常見問題有哪些嗎?讓我們一起來看看吧!
一、液體培養(yǎng)基為什么顏色不一樣
酚紅加量不同,導(dǎo)致顏色差異:DMEM>MEM>DMEM/F12>RPMI1640>F12&F10。
二、培養(yǎng)基放冰箱里顏色變深
空氣中CO2濃度低,培養(yǎng)基內(nèi)CO2會(huì)逐漸溢出,HCO3-減少,造成培養(yǎng)基偏堿。
三、含有谷氨酰胺培養(yǎng)基的保存條件
谷氨酰胺對(duì)溫度敏感,溫度越高降解速度越快。谷氨酰胺在溶液中不穩(wěn)定,單獨(dú)保存應(yīng)置于-20℃冰箱中。加有谷氨酰胺的液體培養(yǎng)基應(yīng)存放在2°C–8°C,或者購(gòu)買不含谷氨酰胺的培養(yǎng)基使用時(shí)添加。
四、液體培養(yǎng)基可以放-20℃及以下保存嗎
不可以。在-20℃下,培養(yǎng)基中的鹽容易析出,培養(yǎng)基融化后,有些鹽無法重新溶解,從而導(dǎo)致滲透壓降低。液體培養(yǎng)基放在2-8℃長(zhǎng)期保存。液體培養(yǎng)基保存要避光。培養(yǎng)基中的某些成分遇光會(huì)產(chǎn)生過氧化氫,具有細(xì)胞毒性
五、購(gòu)買的液體培養(yǎng)基可以保存多久
理論上只要保存得當(dāng),保質(zhì)期范圍之內(nèi)都可以用。但實(shí)際開瓶后保存時(shí)間過長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致液體培養(yǎng)基中鹽分的析出和pH值的改變,因此建議開瓶后盡快用完
六、更換培養(yǎng)基后細(xì)胞長(zhǎng)不好
?。?)各廠家培養(yǎng)基配方并非完q相同,可能細(xì)胞已經(jīng)適應(yīng)當(dāng)前的培養(yǎng)體系;
?。?)原代細(xì)胞更容易適應(yīng)新的培養(yǎng)基,而傳代細(xì)胞系更換比較難;
?。?)剛復(fù)蘇的細(xì)胞不要用來適應(yīng)新培養(yǎng)基,細(xì)胞活率低,待狀態(tài)穩(wěn)定后再用來馴化;
(4)敏感性細(xì)胞適應(yīng)培養(yǎng)基,需要多馴化幾代,期間細(xì)胞死亡數(shù)量減少,生長(zhǎng)緩慢是正?,F(xiàn)象。
七、DPBS和PBS有什么區(qū)別,能通用嗎
都屬于磷酸鹽緩沖液,成分上只有一點(diǎn)點(diǎn)磷酸鹽的含量差異,均有等滲和調(diào)節(jié)pH的功能,大多數(shù)對(duì)于細(xì)胞的使用上可以通用。
八、HBSS和PBS/DPBS有什么區(qū)別
HBSS緩沖液中鹽成分較PBS和DPBS更復(fù)雜,且含有葡萄糖,可為細(xì)胞提供簡(jiǎn)單的營(yíng)養(yǎng),而PBS/DPBS不能提供營(yíng)養(yǎng)。
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